Всю процедуру кариотипирования можно разбить на 2 этапа.
Этап первый: технический - приготовление препаратов для анализа
Давайте разберем подробнее, что же это такое. Итак, из курса биологии вы знаете, что хромосомы расположены в ядре клетки. Любые клетки любых тканей организма, имеющие ядро, содержат хромосомы. Однако, в медицинской практике, набор тканей, используемых для получения хромосом, ограничен. Главным требованием в этом вопросе является простота получения образца для исследований. И с этой позиции кровь является идеальным кандидатом. Забор венозной крови легко осуществить в любом медицинском учреждении, это практически безболезненная и быстрая по времени процедура. Взятую в пробирку порцию крови легко транспортировать в лабораторию и т. д.
Но есть и минусы. Дело в том, что не все клетки крови содержат ядро. Эритроциты, например, не содержат и для анализа не годятся. Самые многочисленные ядросодержащие клетки, это лейкоциты и лимфоциты. Но и это еще не все подводные камни. Лейкоциты и лимфоциты, циркулирующие в крови взрослого здорового человека, называются «зрелыми» и не способны делиться (размножаться). А нам для анализа нужно получить не просто делящиеся клетки, но и остановить процесс деления строго на определенной стадии, называемой «метафаза». Что бы этого добиться, мы, цитогенетики, прибегаем к целому ряду ухищрений: стимулируем клетки специальным веществом, под воздействием которого они «превращаются» в «незрелые» или бласты и начинают делиться. Кроме того, помещаем клетки в специальную культуральную среду, которая содержит все необходимые элементы для жизнедеятельности, ведь, извлеченные из организма клетки крови должны чем-то питаться, для того, чтобы не только жить, но и размножаться. Полный клеточный цикл (все стадии деления) длится 24 часа. Для того, чтобы врач смог приступить к анализу хромосом, необходимо, что бы делящихся клеток было как можно больше, поэтому для получения качественных препаратов хромосом клетки культивируют (выращивают) 72 часа=3 клеточных цикла=3 суток.
Но и это еще не все! Теперь нужно сделать так, чтобы хромосомы стали доступны для исследования, т.е. извлечь их из ядра, поместить на стекло, да еще добиться того, что бы они с этого стекла не соскользнули. Весь этот процесс называется обработкой препарата и длиться около 5 часов. А дальше хромосомы нужно визуализировать, покрасить специальными биологическими красителями. Но вот беда-свежие, только что полученные препараты для этого не годятся. Их нужно «состарить». Т.е. 2-3 суток стекла просто лежат и ждут своей очереди. Этот этап чрезвычайно важен, так как позволяет получить хорошую окраску хромосом, без получения которой анализ невозможен! Итого мы имеем: 3 суток инкубация + 5 часов (рабочий день) фиксация + 3 суток подготовка к окрашиванию = 7 дней или целая неделя. Столько времени уходит на технический этап и то при условии, что все пройдет без сбоев и ничего не придется переделывать.
А дальше наступает второй этап: аналитический - исследование хромосом , о котором мы поговорим в следующий раз.
Если у вас возникают вопросы-спрашивайте, я постараюсь на них ответить. Наиболее часто задаваемые вопросы будут служить темами для следующих бесед.
Что означают полоски на хромосомах? Продолжаем обсуждать кариотип!
С уважением, врач акушер-гинеколог ЦИР Панасенко С.Г.
Делали анализ на кариотип младенцу.
Результат кариотип 46ху, указано количество метафаз 10.
Это значит, что исследовали 10 клеток? Можно ли исключить можно ли исключить мозаичный синдром дауна по такому исследованию?
Нормальный хромосомный набор состоит из 46 хромосом, или 23 пар, в каждой паре одна хромосома материнского, одна - отцовского происхождения. В результате мутаций возможно появление особенностей кариотипа, например, соединение непарных хромосом. В Вашем случае 14-ая хромосома "приклеилась" к 15-ой. Потери генетического материала не произошло, поэтому человек здоров. Но вместо 46 хромосом под микроскопом выявляются 45, так как две хромосомы представляют собой единую структуру. Имеются по одной обычной хромосоме и в 14-ой, и в 15- ой парах. При созревании половых клеток происходит специфический процесс деления, в результате которого зрелые половые клетки содержат только одну из пары хромосом, для того, чтобы при оплодотворении, при слиянии половых клеток восстановился хромосомный набор из 46 хромомом. Поскольку "склеенные" хромосомы не могут разделиться, они передаются вместе, если дополнительно в зрелую клетку попадают ещё и по одной хромосоме из 14, или из 15 пары, то уже появляется лишняя хромосома. Это тяжёлое нарушение генетического баланса. Тем не менее возможен и нормальный вариант распределения хромосом. Если кариотип несбалансированный, то есть с лишней 15, или с лишний 14 хромосомой, возможна остановка беременности в развитии в первом триместре беременности.
Врач-генетик Захарова Ольга Михайловна
Приём Амоксиклава может повлиять на цитогенетические исследования, то есть кариотипирование. На другие исследования, например ДНК-анализ, не повлияет. Месяц - это идеальный срок, чтобы быть уверенным в отсутствии помех для выращивания клеточной культуры.
Врач-генетик Захарова Ольга Михайловна